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产品说明/Specification Sheet
| 产品名称： | DAPI | ||||
| 产品编号： | CD4261-10mg | 规格： | 10mg | 价格： | ￥580 |
| 产品类别： | 生化试剂 | CAS#： | 28718-90-3 | ||
| 品牌： | COOLABER | 级别： | 染色剂 | ||
| 分子式： | C16H15N5 ·2HCl | 分子量： | 350.25 | ||
| 危险品： | 危险品系数： | ||||
| 储存条件： | 2-8℃ | 说明书： |  |
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产品属性：
物理性质： 黄色粉末，易溶于水,最大溶解度为2.5％。
产品用途：DAPI是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。
4. 染色过程
(1) 用1mL ddH2O将DAPI溶解，制得2.9mM的DAPI溶液(1mg DAPI/1mL H2O)。
注：DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解，需要先用水将其溶解。
(2) 取适量DAPI水溶液加到PBS中，制备成10～50µM的DAPI溶液。
推荐以下PBS的配制方法：
将8.0g NaCl、0.2g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4 溶解于1L纯水中。
(3) 将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以用1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。
(4) 在37℃培养细胞10～20分钟。
(5) 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(6) 用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
注意事项：
DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长，仅有少部分重叠，研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。
DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，因此DAPI对生物体而言，也被视为一种毒性物质与致癌物。使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。
DAPI荧光染料,可穿透细胞膜与细胞核双链DNA结合发挥标记作用,产生比自身强20多倍荧光,对双链DNA染色灵敏度高EB很多倍。显微镜下看显蓝色荧光细胞,荧光效率几乎为100%,且对活细胞无毒副作用.常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测.也用于普通细胞核染色及某些特定情况下的双链DNA染色。
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